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熒光顯微鏡是一種使用熒光或磷光物質的光學顯微鏡,主要是用紫外線照射被檢測物,并使其發(fā)出熒光,即可在顯微鏡下觀察被檢測物的形態(tài)及位置。
熒光顯微鏡使用反射和吸收研究有機或無機物質的特性?!盁晒怙@微鏡”是指使用熒光來產(chǎn)生一個圖像的顯微鏡,無論是相對簡單的設置,如落射熒光顯微鏡,或更復雜的設計,如共聚焦顯微鏡,都是使用光學切片,以獲得分辨率更高的熒光圖像。
熒光顯微鏡光源:
熒光顯微鏡由光源、濾色系統(tǒng)和光學系統(tǒng)等主要部件組成。其中,光源通常采用200瓦的超高壓汞燈,由石英玻璃制作而成;濾色系統(tǒng)由激發(fā)濾板和壓制濾板組成;光學系統(tǒng)包括反光鏡、聚光鏡、物鏡和目鏡,熒光顯微鏡主要用于研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等,可對這類物質進行定性和定量分析。
熒光顯微鏡的光源,要求強烈的、近乎單色光的照明,這是一些普遍的光源,比如鹵素燈泡不能提供的。熒光顯微鏡的光源包括氙氣燈或帶有激發(fā)濾片的水銀燈,激光,超連續(xù)光譜光源和高功率發(fā)光二*管。激光被廣泛地用于更復雜的熒光顯微技術,像共聚焦顯微鏡或全內反射熒光顯微鏡。而氙氣燈,水銀燈,和發(fā)光二*管與分色激發(fā)濾片通常被用于廣角落射熒光顯微鏡。
熒光顯微鏡工作原理:
熒光顯微鏡的原理是某些物質經(jīng)過一定波長的光照射后,物質中的分子被激活吸收能量后躍遷至激發(fā)態(tài),當其從激發(fā)態(tài)返回至基態(tài)時,所吸收的能量部分轉化為熱量或用于光化學反應,大部分則以光能形式輻射出來,其中輻射出的光的波長長于激發(fā)光的可見光為熒光。
2014年10月8日,諾貝爾化學獎頒給了艾力克·貝齊格,威廉·莫爾納爾和斯特凡·赫爾,表揚其發(fā)展超高清晰度熒光顯微鏡,帶領光學顯微鏡由微米級進入納米級尺度中。